病毒灭活原理 病毒蛋白质变性 破坏包膜
2024-05-26 【 字体:大 中 小 】
1、破坏包膜:包膜含有脂类物质,因之有包膜的病毒可*被脂溶剂破坏,如、氢仿或去氧胆酸钠可使病毒灭活。实际上可利用病毒对脂溶剂的敏感性来检查病毒是否有包膜。物理因子,如渗透压改变、冻融、热和干燥等都可引起包膜破坏。一般认为,呼吸道感染的病毒对于燥抵抗力弱,传播主要是人间直接感染,这是因为有包膜的原故。
2、病毒蛋白质变性:能使蛋白质变性的化学制剂郜能使病毒灭活,如酚、、次氩化物、酸和碱等。加热引起变性也是有效灭话的方法。一般说病毒对热抵抗力弱,60℃几分钟就使之感染性明显降低,因此在分离病毒时,从患者取来的标本需低温保存,*送往实验室,长期保存置于-8OC以下的低温条件。
3、病毒核酸的损害:、y线等电离辐射可切断核酸,紫外线可使核苷酸链上相邻的崆啶减基形成二聚物,而破坏病毒基因的功能。另外叶啶橙或中性红等染料可与病毒核酸结合,暴露于光线之下,可使核酸分解,而使病莓灭活。
病毒灭活滴度计算方法∶终点稀释法病毒感染滴度的计算以半数细胞感染剂量(TCID5o)表示。TCID5o的对数值计算公式如下。
TCD5o对y数值=病变率*50%组稀释度的对数值+距离比例(“病变率*50%组”是指病变率*过50%的组,下简称“*50%组”;“病变率**50%组”是指病变率**50%的组,下简称“**50%组”)。
病毒灭活试验器材:
1、试验用病毒株:脊髓灰质炎病毒1型(poliovirus-l,PV-l);株;艾滋病病毒1型(HIV-1)美国株。
2、宿主细胞可采用VERO细胞系、BGM细胞、Hela细胞系或FlL、细胞系,作为PV-1的测试细胞。用含有人T淋巴细胞白血病房毒1型(human Tcell leukemiavirus 1, HTLV-1)基因的人淋巴细胞(株)作为HIV-1的测试细胞。
3、细胞培养瓶与96孔培养板。
4、恒温水浴箱。
5、二氧化碳培养箱。
6、层流*净工作台。
7、低温冰箱(-20°℃,-80°C).8、液氮罐。
9、倒置显微镜。
10、离心机。
11、可调移液器及配套一次性塑料吸头。12、细胞维持培养基。
13、细胞培养基。
14、去离子水。
病毒灭活试验适用范围:主要适用于消毒产品或日常监测。用具有一定代表性的、活的病毒及其细胞感染技术,评价各种用途的消毒因子对测试病毒的杀灭效果。按此方法进行的试验,只是对消毒因子的灭活病毒能力的重要方面进行验证。
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